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    FLT3-ITD/BaF3

    CBP73096

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    I. Background

          FLT3-ITD 基因是 FLT3 基因的一种突变形式,属于 FMS 样酪氨酸激酶家族,位于人类 13 号染色体长臂(13q22.2)。该基因编码的蛋白是一种跨膜受体蛋白,属于 III 型受体酪 氨酸激酶(RTK)家族成员,在造血细胞的生长、增殖和分化中发挥关键作用。

          FLT3-ITD 突变是 FLT3 基因近膜结构域的内部串联重复,通常发生在 14/15 号外显子 上,插入的重复序列长度一般 3-400 bp 不等,且总是以三倍的倍数出现,保留转录本的阅 读框。这种突变导致 FLT3 蛋白在无配体结合的情况下发生二聚体化并持续自我磷酸化, 增强激活酪氨酸激酶活性,使得下游信号通路(如 RAS/MAPK、PI3K/AKT 等)持续激活, 导致细胞增殖失调。

     
    II. Description

          BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。顺利获得引入各种表达激酶的基因, 能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依 赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见下图所示。
     



    Figure 1. 
    FLT3-ITD BaF3 细胞的构建原理图

     
    III. Introduction
    Cell Line Name: FLT3-ITD/BaF3
    Host Cell: Ba/F3
    Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
    Application: Useful for the study of enzyme kinetics, screening inhibitors, and selectivity profiling.
    Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
    Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS
    Mycoplasma Status: Negative
     
    IV. Representative Data

    1.WB of FLT3-ITD/BaF3


    Figure 2. WB of FLT3-ITD/BaF3.


    2. Sanger of FLT3-ITD/BaF3



    Figure 3. Sanger of FLT3-ITD/BaF3.

    3. Anti-proliferation assay

     Figure 4. CTG Proliferation Assay of  FLT3-ITD BaF3 (C5).

     

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